電泳加工的另一種--瓊脂糖凝膠電泳

 一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以；如果需要分辨率高的電泳，特別是只有幾個bp的差別應該選擇聚丙烯酰胺凝膠電泳；用普通電泳不合適的巨大DNA鏈應該使用脈沖凝膠電泳。注意巨大的DNA鏈用普通電泳可能跑不出膠孔導致缺帶。

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。這是我做病毒檢測實驗試劑盒的說明書部分，看是否對你有幫助：

配制1%的膠進行電泳

1 稱取0.4g瓊脂糖放于錐形瓶中，再量取40ml的0.5×TBE溶液混合，放于微波爐中煮沸，至溶液清徹透明為止，大約需1分40秒。

2 冷卻到60℃時（放于掌心，能感覺到湯但又能忍受。）加2μl核酸染料，搖勻。

3 組裝好制膠器，并調至水平。將膠倒于制膠器中，插好梳子。待40分鐘膠冷卻凝固后，就可放于倒好電泳緩沖液的電泳槽中進行點樣。

4 取5-10μl樣品溶液，加1-2μl 6×loading Dye，混合均勻后進行點樣。每排點樣孔要點一個5μl的Marker。

5 點完后，調電泳儀各參數進行電泳：U：80V；A；200A；T：40min。

做實驗需要注意的一點就是要戴手套操作，保護好自己。像如果用的核酸染料是EB、緩沖液是TAE的話，就要更加小心了，那玩意兒致癌性比較強；像我們用的是GoldViewTM 核酸染料和TAE還不是特別要緊還有就是，這里說的40ml制的一般都是25孔的中膠，你要根據所需要的孔數來按比例調節用量。膠不能制的太厚或者太薄，二者都不利于電泳的。

煮膠的時候，一定要讓膠完全溶解（拿起來對著光照看，沒有亮亮的小點出現），不然跑出來的膠不好看；煮的時間也不能太長，煮久了對樣品的回收這類的可能有影響的。